内参和目的蛋白期刊要求解读_人类死后可以重生吗(2024年11月精选)
WB实验:内参与目的蛋白同膜共存 젗B实验,即Western blot,是一种常用的免疫印迹技术,用于检测蛋白质的存在和表达。近年来,期刊对实验的要求不断提高,尤其是内参和目的蛋白需要在同一张膜上显示。 现在,通过先进的实验技术,完全可以在同一张膜上同时显示内参和目的蛋白,甚至双带也可以与内参共存。
WB实验难?10招提高成功率! 经常做 Western blot 的朋友们,你们是否也有过这样的困惑?每次实验都像是开奖,结果总是让人捉摸不透。十个 WB 实验,七个失败,八个丑陋,九个出问题,还有一个完全不出结果。条带失踪、背景漆黑、杂带丛生……这些问题简直让人崩溃。 有时候,即使你凑齐了所有的“天时地利人和”,也不一定能得到一组完美的条带。江湖传言,一个生物学博士要跑满 1000 块胶才能顺利毕业。WB 实验本身就很难,再加上“造假”、“撤稿”、“学术不端”等丑闻,使得主流期刊对 WB 数据的要求越来越高,甚至要求作者提供原始数据和未切割的 WB 全膜条带。 对于那些出道已久的“老博士”来说,WB 的“玄学”操作早就积累了一本厚厚的攻略。今天,我就来分享一些精华内容,帮助大家提高 WB 实验的成功率,让你的条带显露真身。 跑胶是 WB 实验成败之母 提高跑胶质量的 Tips 蛋白分子量偏高或偏低 슥糖𝦘糖𖧚浓度与目的蛋白的浓度不对应。比如说,你用 12% 的胶跑 100KD 的蛋白,或者用 8% 的胶跑 20KD 的蛋白。 蛋白质降解 𑊨白质降解后很可能会在比原来位置低的地方出现主带,然后出现一些其他带。最主要的特点是所有的条带都比正常的低,并且条带模糊不清晰。 所有条带连成一片无间隔 最可能是上样量过多,其次是样品弥散(比如电泳长时间停止样品弥散)。 溴酚蓝拖尾 篸 样品溶解不好或上样前未变性完全。 纵向的纹理 上样样品中存在不溶性颗粒。 溴酚蓝很粗 𓊦𖦵缩效果不好,可能是浓缩胶太短或者配错。 在分离胶中跑不动 ️ Tris-Cl pH 值不对,或者忘记加 SDS。 一抗加成其他抗体或二抗种属加错 𐊥悦 marker 正常,其他位置没有条带,最可能是一抗加成其他抗体,或者二抗种属加错了,比如兔的加成鼠的。 解决办法 目的蛋白完全无信号,但同时做的内参是正常的,那么大部分情况是一抗抗体失效或用错二抗。 目的蛋白和内参均无信号,则考虑是否发光液失效。如果膜上没有 marker 则为转膜失败。 如果中间出现了细微条带,可能是蛋白上样量太少,或一抗浓度过低。 经验之谈 如图所展示的,一点信号都没有,大部分情况是因为抗体加错了。如果中间出现细微的条带,可能是蛋白上样量太少,一抗浓度过低,ECL 发光液失效。 希望这些小技巧能帮助大家在 WB 实验中少走弯路,提高实验成功率!ꀀ
2024出彩中国少儿书画大赛报名啦!芥小朋友们,你们是不是也喜欢画画写字呢?那就赶紧来参加2024出彩中国谟槔稵吧!这次大赛可是给3-17岁的小朋友们准备的,不管你是幼儿园的小朋友,还是中小学的学生,甚至是少年宫、青少年活动中心的学员,都可以报名哦! 报名时间:2024年9月6日—2025年2月19日 作品主题:这次大赛的主题形式不限,只要不涉及宗教、政治和封建迷信,内容积极向上就行啦。你可以画自己喜欢的任何东西,比如动物、植物、风景、人物等等。 作品形式:硬笔、软笔书法、儿童画、水彩画、卡通漫画、油画、素描、速写、版画、中国画、手工、综合材料……只要你喜欢,都可以尝试! 荣誉颁发 学生荣誉: 特等奖、一等奖、二等奖、三等奖,获奖作品都会颁发荣誉证书和社会实践证书哦!特等奖作品还会在「新芽内参」期刊上发表,限量发行2000套,并且赠送全套6本期刊。 老师荣誉: 本届大赛确认领奖的老师可以获得荣誉证书,并且有机会受邀出席“ART创享领域第一届美育代表大会”,颁发指导老师奖杯。 集体荣誉: 本届大赛确认领奖的机构可以获得【美育教育先进单位】称号,并且有机会受邀出席“ART创享领域第一届美育代表大会”,颁发美育单位牌匾。 所以,小朋友们,赶紧拿起你们的画笔,开始创作吧!希望大家都能在这次大赛中取得好成绩哦!耀
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