期刊要求蛋白需要全膜下载_怎样记忆m n 体(2024年12月最新版)
全膜时代,WB实验成本飙升! 什么是全膜? 很多人误以为全膜就是所有蛋白都在一张膜上跑,但实际上,全膜指的是用显影仪拍照得到的图片,未经任何裁剪、拼接等处理。一些期刊要求全膜必须包含分子大小标记物,甚至在特定情况下需要阳性和阴性对照。例如,期刊J CELL BIOCHEM就明确要求这一点。(图2,图片源于Journal of Molecular Medicine-JMM) 为什么要全膜? WB实验在生物学领域容易造假,有些人为了得到预期的实验结果,会直接转染过表达质粒或shRNA质粒来控制蛋白表达量。更离谱的是,有些实验室甚至直接更改蛋白名字,将A蛋白的数据结果改为B蛋白。这些“骚操作”迫使各大杂志要求提供全膜材料,以减少数据的不真实性。 全膜的成本增加 更换为全膜后,实验室的成本大幅增加。首先,抗体消耗是WB实验的主要成本之一。虽然抗体成本在逐步降低,但更换为全膜后,抗体使用量可能是之前的2-3倍,导致成本呈指数型增长。 其次,在裁膜时代,一张膜可以最大化利用,可能检测多个指标。换为全膜后,一张膜只能检测一个指标。这不仅增加了时间成本,还增加了试剂成本。例如,制备凝胶、电泳、转膜等过程中所使用的试剂成本也在大幅增加。总体下来,成本可能是之前的3-5倍。 最后,还有人力成本。正常一个WB实验从制备样本到完成检测,再到最后的显影结束可能花费2-3天。现在不论是使用抗体剥离液还是一张胶只进行一个抗体指标的检测,都会大幅度提高人力成本。 总结 综上所述,WB实验更换为全膜后,一次实验的成本可能是之前的5倍左右。同时,时间花费也会是之前的2-3倍,甚至更多。这不仅会增加实验室的成本,还会让研究生们花费更多时间进行实验。在研究生涯中,这无疑是一笔额外的负担。
WB实验新手必看:电泳、电转和封闭全攻略 电泳技巧: 在WB实验中,电泳是关键的一步。建议使用66V恒压进行电泳,这样跑出来的条带会非常美观。 电转操作: 对于大分子量的蛋白质(超过100KD),建议使用10%的甲醇,因为甲醇浓度过高时,小分子量(小于20KD)的蛋白质容易转出。 小分子量的蛋白质则可以使用20%的甲醇,如果分子量在20以下,建议使用0.22uM的PVDF膜。注意,很多期刊要求整张膜进行WB敷,因此在开始实验前要确定好目标期刊的要求。 封闭过程: 磷酸化指标通常需要使用BSA进行封闭,有时还需要用TAE或其他试剂调节pH。实际上,使用普通的5%BSA粉末封闭也可以得到漂亮的条带。如果目标是发表高分文章,可以尝试调整pH。 普通指标可以使用5%的脱脂奶粉进行封闭。 ✂️ 切膜技巧: 这一步非常关键,必须提前熟悉自己指标的分子量。熟悉分子量可以帮助你更准确地切膜,从而提高实验的准确性。
WB实验:内参与目的蛋白同膜共存 젗B实验,即Western blot,是一种常用的免疫印迹技术,用于检测蛋白质的存在和表达。近年来,期刊对实验的要求不断提高,尤其是内参和目的蛋白需要在同一张膜上显示。 现在,通过先进的实验技术,完全可以在同一张膜上同时显示内参和目的蛋白,甚至双带也可以与内参共存。
WB实验难?10招提高成功率! 经常做 Western blot 的朋友们,你们是否也有过这样的困惑?每次实验都像是开奖,结果总是让人捉摸不透。十个 WB 实验,七个失败,八个丑陋,九个出问题,还有一个完全不出结果。条带失踪、背景漆黑、杂带丛生……这些问题简直让人崩溃。 有时候,即使你凑齐了所有的“天时地利人和”,也不一定能得到一组完美的条带。江湖传言,一个生物学博士要跑满 1000 块胶才能顺利毕业。WB 实验本身就很难,再加上“造假”、“撤稿”、“学术不端”等丑闻,使得主流期刊对 WB 数据的要求越来越高,甚至要求作者提供原始数据和未切割的 WB 全膜条带。 对于那些出道已久的“老博士”来说,WB 的“玄学”操作早就积累了一本厚厚的攻略。今天,我就来分享一些精华内容,帮助大家提高 WB 实验的成功率,让你的条带显露真身。 跑胶是 WB 实验成败之母 提高跑胶质量的 Tips 蛋白分子量偏高或偏低 슥糖𝦘糖𖧚浓度与目的蛋白的浓度不对应。比如说,你用 12% 的胶跑 100KD 的蛋白,或者用 8% 的胶跑 20KD 的蛋白。 蛋白质降解 𑊨白质降解后很可能会在比原来位置低的地方出现主带,然后出现一些其他带。最主要的特点是所有的条带都比正常的低,并且条带模糊不清晰。 所有条带连成一片无间隔 最可能是上样量过多,其次是样品弥散(比如电泳长时间停止样品弥散)。 溴酚蓝拖尾 篸 样品溶解不好或上样前未变性完全。 纵向的纹理 上样样品中存在不溶性颗粒。 溴酚蓝很粗 𓊦𖦵缩效果不好,可能是浓缩胶太短或者配错。 在分离胶中跑不动 ️ Tris-Cl pH 值不对,或者忘记加 SDS。 一抗加成其他抗体或二抗种属加错 𐊥悦 marker 正常,其他位置没有条带,最可能是一抗加成其他抗体,或者二抗种属加错了,比如兔的加成鼠的。 解决办法 目的蛋白完全无信号,但同时做的内参是正常的,那么大部分情况是一抗抗体失效或用错二抗。 目的蛋白和内参均无信号,则考虑是否发光液失效。如果膜上没有 marker 则为转膜失败。 如果中间出现了细微条带,可能是蛋白上样量太少,或一抗浓度过低。 经验之谈 如图所展示的,一点信号都没有,大部分情况是因为抗体加错了。如果中间出现细微的条带,可能是蛋白上样量太少,一抗浓度过低,ECL 发光液失效。 希望这些小技巧能帮助大家在 WB 实验中少走弯路,提高实验成功率!ꀀ
三款乳铁蛋白奶粉,哪款更值? 最近天气变化大,加上开学季,乳铁蛋白奶粉的热度真是蹭蹭往上涨!今天,应各位宝妈的要求,我们来测评三款备受瞩目的乳铁蛋白奶粉:美赞臣蓝臻、皇家美素佳儿和飞鹤星飞帆卓睿。我们将从多个维度进行测评,看看哪款奶粉能在众多选择中脱颖而出! 乳铁蛋白含量 美赞臣蓝臻3段的乳铁蛋白含量为330mg/100g。不同年龄段的产品含量有所不同,科学添加营养成分,满足宝宝的不同需求。 皇家美素佳儿的乳铁蛋白含量为450mg/100g。全段含量一致,适合肠胃较敏感的宝宝。 飞鹤星飞帆卓睿2-3段的乳铁蛋白含量为45mg/100g,1段未添加乳铁蛋白。 配方科学实证 美赞臣蓝臻是唯一一款在全球知名学术期刊《儿科学杂志》上公布全配方科学实证的奶粉。经过5年追踪,证实喝蓝臻的宝宝保护力显著提升,生病次数减少。 皇家美素佳儿和飞鹤星飞帆卓睿目前尚未查到科学实证的相关资料。 强化配方 美赞臣蓝臻:除了乳铁蛋白,还添加了乳脂球膜和模拟母乳低聚糖HMO,有助于宝宝肠胃健康和吸收力。DHA含量达0.4%。 皇家美素佳儿:添加了短链益生元GOS,有助于吸收力。DHA含量为0.28%。 飞鹤星飞帆卓睿:主打OPO+益生元添加,更侧重于肚肚保护力。DHA含量为0.26%。 综合来看,这三款奶粉在保护力、吸收力和脑动力方面都有不错的表现。如果你正在考虑给宝宝换奶粉,不妨参考一下我们的测评结果。希望每位宝妈都能找到最适合自己宝宝的奶粉!
高蛋白全麦面包,减脂必备! 这款面包采用了全麦和谷朊粉,无需手套膜,简单搅拌后一次性发酵,省时省力。高蛋白且能拉丝,非常适合减脂人群。 材料准备: 谷朊粉:80克 蛋白粉:10克 豆浆粉:10克 全麦粉:100克 粗全麦粉:100克 盐:3克 鸡蛋:1个 鲜酵母:9克(干酵母3克) 水:180-200克,根据面粉吸水量调整,我用了190克 制作步骤: 将所有材料混合,用刮板搅拌,此时会粘手,但无干粉即可。盖上保鲜膜,醒面20分钟。 下手揉成光滑面团(建议带手套,因为仍有点粘手)。加入10克椰子油(无椰子油可用黄油代替),完全融合。 给模具抹上黄油或油纸,便于脱模。将面团整形后放入模具中,发酵至2倍大。 预热烤箱至180度,上下火,最底层烤25分钟。如有热风功能,最后6分钟吹热风;无热风功能则烤完后静置5-10分钟再取出,防止回缩。 快来试试这款高蛋白全麦面包吧!
hCG高一定是怀孕吗? hCG一般指人绒毛膜促性腺激素,人绒毛膜促性腺激素高可能是怀孕这一生理性原因导致的,也可能是绒毛膜癌、畸胎瘤等病理性原因导致的。 一、生理性原因 人绒毛膜促性腺激素是一种糖蛋白激素,怀孕以后是由胎盘细胞所产生,可以保护胚胎免受母体免疫系统攻击,从而维持妊娠。 二、病理性因素 1.绒毛膜癌:绒毛膜癌是一种高度恶性肿瘤,病因尚不清楚,可以继发于正常或异常妊娠之后,主要表现为腹痛、阴道异常流血,初期的患者,体内的人绒毛膜促性腺激素会出现明显的升高。患者可以采取全子宫切除术来治疗,或者遵医嘱使用氟尿嘧啶注射液、注射用异环磷酰胺、注射用硫酸长春新碱等药物来治疗。 2.畸胎瘤:畸胎瘤是来源于胚胎性腺的原始生殖细胞,是最常见的生殖细胞肿瘤,多见于卵巢、睾丸等部位,大多数为良性,可能会分泌人绒毛膜促性腺激素,导致性早熟。患者可以采取患侧附件切除术,或肿瘤剥除术来治疗,术后注意合理饮食,加强营养。 患者出现异常症状,需要及时前往医院进行血清肿瘤标记物、体格检查、B超检查等,明确病因后,需要采取手术治疗、药物治疗等。#健康科普#
【Cell:新研究发现生物凝聚物能够调节细胞电化学平衡】大多数生物化学研究历来侧重于维持生命运转的机械齿轮。折叠蛋白质、基因活动和电子信号通路是发现导致疾病的异常现象的最简单目标。然而,近期的研究已发现有一种不同类型的细胞结构可能发挥着同样重要的作用。这些结构被称为生物凝聚物(biological condensate),它们因密度不同而存在,就像漂浮在水中的油滴,在细胞内部形成区室,而不需要膜包围的物理边界。 以前的研究表明这些生物凝聚物可以分离或困住某些蛋白质和分子,阻碍或促进它们的活动。他们还发现,这些结构提供了一种替代能源,可能为生物化学的某些方面提供动力。不过,这些研究成果主要集中在生物凝聚物本身附近产生的影响上。科学家们还没有确定它们在物理结构之外可能影响生物化学的方式。 如今,在一项新的研究中,来自杜克大学和华盛顿大学的研究人员发现生物凝聚物的形成对细胞活动的影响远远超出了其附近的范围。相关研究结果于2024年9月10日在线发表在Cell期刊上,论文标题为“Biomolecular condensates regulate cellular electrochemical equilibria”。网页链接
旅行必备!这款面膜让你轻松出行 旅行时,带上这款面膜,让你的肌肤在旅途中也能保持最佳状态! ♀️ 这款mamacos蚕丝多肽抗皱滋润双效面膜(3部曲),集洁面、面膜和精华于一体,为肌肤提供全方位的护理。 𘠩⨆含有银耳多糖、水解胶原蛋白和荷花提取物等保湿成分,敷后肌肤水嫩光滑。 砨布贴合度高,使用后肌肤水润服帖。 搭配24K黄金安瓶精华,含有100PM黄金,为肌肤注入活力,使用后肌肤Q弹。 行时,无需携带多种护肤品,这款面膜就能满足你的肌肤需求。
万洋纳米石墨烯电池 《Materials Research Bulletin》是一本专注于功能材料和纳米材料的高影响力国际期刊。它特别关注材料的加工-结构-性能关系,发表具有独特电子、磁性、光学、热学、机械或催化特性的研究。尽管它不主要关注纯热力学或理论计算(例如密度泛函理论),但这些研究必须能够明确展示与物理特性的直接联系。 该期刊涵盖的主题广泛,包括但不限于: 功能材料(例如电介质、热电体、压电体、铁电体、弛豫体、热电材料等); 电化学和固态离子学(例如光伏、电池、传感器、燃料电池); 纳米材料、石墨烯和纳米复合材料; 发光和光催化; 晶体结构和缺陷结构分析; 新型电子产品; 非晶固体; 柔性电子产品; 蛋白质-材料相互作用; 聚合物离子交换膜 《Materials Research Bulletin》由国际权威数据库SCI、SCIE收录,被认为是材料科学领域的顶级期刊之一。它致力于发表经过严格同行评审的高质量原创文章,反映工程技术-材料科学:综合领域的新进展、新技术、新成果,促进该领域科研交流和科研成果转化。 根据科研通的数据,该期刊2023年的影响因子为4.1,历年影响因子波动在4到6之间。期刊的出版周期为每月,年发文量约为300篇左右,自引率为2.40%,h-index(2021年数据)为135。在中科院JCR最新升级版分区表中,该刊在工程技术大类中处于2区,在材料科学:综合小类中处于3区。 期刊的审稿速度平均约为4.1个月,且近三年来没有被列入预警名单。
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